Nachweisverfahren mit immunologischer Technik:  ELISA-Test 
Def. ELISA: Enzyme-Linked-Immuno-Sorbent-Assay = Enzymgekoppelter Immunabsorptionstest
Der ELISA –Test macht sich die spezifische Erkennungsreaktion zwischen Antigen und Antikörper zunutze und koppelt diese mit einer enzymgesteuerten Farbreaktion.
Im "Sandwich"-Verfahren sind mehrere Arbeitsschritte nötig, bis eine Farbreaktion die Anwesenheit eines bestimmten Stoffes (meist ein Protein) beweist.
Im 1.Schritt wird die Substanzprobe auf ein Trägermaterial (z.B. Wand eines Teströhrchens) gebracht auf dem Antikörper fixiert sind, die spezifisch für eine bestimmte Substanz (=Antigen) sind.
Im 2.Schritt (nach einer Spülung) gibt man Antikörper hinzu, die für die gleiche Substanz spezifisch ist, aber zusätzlich mit einem Enzym gekoppelt sind. Ist der gesuchte Stoff in der Substanzprobe enthalten gewesen, dann hat sich ein "Sandwich" AK-AG-AK gebildet.
Im 3.Schritt (wieder nach einer Spülung) gibt man eine Farbstoff-Vorstufe zu, die als Substrat für das Enzym in einen Farbstoff umgewandelt wird.
Die Verfärbung erfolgt also nur, wenn das Enzym im Sandwich fixiert ist, d.h. wenn der nachzuweisende Stoff anwesend ist.
Andere Variante des ELISA-Tests:
Der HIV-Test:
1.Schritt: Serum einer Testperson wird auf  das Trägermaterial gebracht, auf dem HIV-Proteine =Antigene fixiert sind. Sind im Serum HIV- Antikörper enthalten, dann werden sie am Trägermaterial festgehalten
2.Schritt: (Nach Spülung) werden Enzym- gekoppelte Antikörper mit Bindungsaffinität zu den HIV-Antikörpern zugegeben.
3.Schritt: (Nach Spülung) Zugabe der Farbstoff- Vorstufe ergibt bei Anwesenheit von AIDS-Antikörpern eine enzymatische Reaktion, die eine sichtbare Verfärbung:   "AIDS-positiv"

weitere Verwendungsbeispiele:
Nachweis von Protein z.B. in Fleischprodukten
Nachweis von Viren (Influenza..)
Nachweis von Antikörpern als indirekter Nachweis einer Infektion (AIDS-Test..)
Nachweis von Hormonen z.B. Schwangerschaftstest:

Fragen:
1) Warum waren ständig Spülgänge zwischen den Teilschritten des Tests nötig - speziell vor dem letzten?
2) Warum ist der Elisa-Test sowohl beim AIDS-Test als auch beim Schwangerschaftstest nur ein indirekter Nachweis?
3) Entwickeln Sie einen Elisa-Test auf eine bestimmte Sorte Fleisch (z.B. Nachweis auf Rindfleisch in Wurst)
4) Zur Herstellung eines ELISA-Tests braucht man massenhaft Antikörper eines ganz bestimmten Typs. Diese monoklonalen Antikörper produziert man mit der Hybridom-Technik. Versuchen Sie den Ablauf dieses Verfahrens am folgenden Schema mit Fachbegriffen zu erläutern.

5) Um nachzuweisen, ob jemand von einem bestimmten Erreger infiziert ist, muss man die gebildeten Antikörper im Blut-Serum des Infizierten nachzuweisen. Dafür gibt es den Immundiffusions -Test.( siehe Schema). Man benutzt dazu "Antiserum", das sind Antikörper, die man speziell gegen bestimmte Antikörper im Blutserum von Infizierten gewinnt.
Worauf beruht dieser Test? Kurze Erklärung des Schemas.
Lösungsvorschläge:

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